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技術(shù)文章

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華雅干細胞為你解答細胞培養(yǎng)常見問題1、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)品極大的影響。來自不同特種的血清，在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。2、欲將一般動物細胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？欲回收動物細胞，其離心速率一般為300xg（約1，000rpm），5-10分鐘，過高之轉(zhuǎn)速，將造成細胞死亡。3、冷凍管應(yīng)如何解凍？取出冷凍管后，須立即放放37℃水槽中快速解凍，輕搖冷凍管使其...

2015 5-26
原代細胞復(fù)蘇的基本操作方法及其常用耗材介紹一、實驗準(zhǔn)備（1）儀器：凈化工作臺、離心機、恒溫水浴箱、倒置相差顯微鏡、培養(yǎng)箱、液氮冰箱（2）玻璃器皿：吸管（彎頭、直頭）、培養(yǎng)瓶、玻璃瓶（250ml、100ml）、廢液缸（3）塑料器皿：吸頭、槍頭、膠塞、移液管（10ml）、15ml離心管、凍存管（1～2ml）（4）其他物品：微量加樣槍、紅血球計數(shù)板、記號筆、醫(yī)用橡皮膏、移液槍（5）試劑：PBS、小牛血清、培養(yǎng)液、雙抗（青霉素、鏈霉素）、胰蛋白酶（0.08%）二、操作步驟（1）從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37℃溫水中，并...

2015 5-25
臍血中分離干細胞-改良HES分離法臍帶血干細胞改良HES分離法是將傳統(tǒng)的HES分離法進行優(yōu)化和改進，在后期給予氯化銨將紅細胞液的體積縮減與分離。詳細的操作步驟如下:1.確保操作時在無菌的環(huán)境下進行，因而需要準(zhǔn)備超凈臺對穿刺部位進行消毒；2.然后將6%的HES分別按照臍血血量的1/4加入到采集來的血袋中；3.混合均勻后使用無菌封口膠密封穿刺點，倒置與10℃的低溫環(huán)境中靜置6小時；4.分離好后先將臍血下層的紅細胞緩慢的放出，取50ml離心管置于其中，然后將血漿放入另一只50ml離心管中；5.把盛有紅細胞的離心管，...

2015 4-22
HES分離紅細胞HES分離紅細胞HES是從支鏈淀粉衍生出來的，是富含淀粉的復(fù)合物，其生理和化學(xué)特性主要由取代級、平均分子量決定。大量實驗表明平均分子量越大對紅細胞的凝集作用越強，有效提高血細胞的沉降速度，從而使血細胞與其它細胞分離。故而，使用HES沉淀法是一種的細胞分離方法。間充質(zhì)干細胞(mesenchymalstemcells,MSCs)是指一群可向成骨細胞、成脂、肪胞、骨髓基質(zhì)細胞、肝臟細胞、心肌細胞和神經(jīng)細胞等多種細胞分化的多潛能組織干細胞,是在細胞治療、基因治療中有效發(fā)揮作用的理想工...

2015 4-22
淺談胰酶的配制方法胰酶的配制方法Hanks液是常見的平衡鹽溶液(BSS)之一。D-Hanks液則是無鈣鎂離子的Hanks液。BSS與細胞生長狀態(tài)下的pH值、滲透壓及無菌狀態(tài)一致，且配方簡單，是組織培養(yǎng)基本用液，常用于配制培養(yǎng)基及其他用液，或洗細胞等，細胞在BSS中可生存幾個小時。胰蛋白酶(胰酸)溶液是一種常用的細胞消化液，原代培養(yǎng)時用于處理組織塊，使細胞分離下來。傳代時用胰蛋白酶使培養(yǎng)細胞離開所貼附的培養(yǎng)瓶表面，并分散成單個細胞。胰蛋白酶主要采自?；蜇i的胰臟，呈白色粉末狀，易潮解，應(yīng)在低溫干燥...

2014 10-29
胸腺素β4在其他方面的應(yīng)用胸腺素β4在其他方面的應(yīng)用胸腺素β-4是一種胚胎在心臟發(fā)育過程中表達的蛋白，它能促進心臟細胞的遷移并影響這些細胞的生死存亡。新研究表明這種蛋白能夠在實驗誘導(dǎo)的心臟病發(fā)作后防止細胞的死亡并限制疤痕組織形成的程度。胸腺素β-4已經(jīng)被用于臨床試驗，以促進皮膚創(chuàng)傷的*。胸腺素β4（一種涉及正在發(fā)育的胚胎中細胞遷移和存活的蛋白）的活性所做的一項研究所表明的那樣。胸腺素β4增強組織培養(yǎng)物中胚胎及出生后心肌細胞的存活能力，在小鼠冠狀動脈結(jié)扎后腹膜內(nèi)注射該蛋白，能成功刺激心臟修復(fù)和激活A(yù)KT...

2014 10-28
羊水細胞培養(yǎng)基的制備方式一、羊水細胞培養(yǎng)基常規(guī)培養(yǎng)法1、采樣：選擇妊娠13-14周婦女，在無菌條件下抽取羊水5ml，立即注入無菌離心管中。2、收集：離心分離細胞，1000rpm10分鐘，去上清，留0.5ml，輕打混勻。3、接種：將混勻的羊水細胞種置于50ml或100ml細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)，平均10ml羊水細胞收集的細胞種置一瓶加5-10ml混合培養(yǎng)液。4、培養(yǎng)：酒精燈火先封口，靜置培養(yǎng)48小時后觀察細胞貼臂及生長情況，5-10天后可見瓶底面有大量羊水細胞生長。5、終止培養(yǎng)：當(dāng)有大量圓形發(fā)亮細胞出現(xiàn)時，加秋...

2014 9-22
ELISA檢測試劑盒原理及使用注意事項ELISA檢測試劑盒檢測原理ELISA檢測試劑盒應(yīng)用定性夾心免疫檢測技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段，分別來自于該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標(biāo)準(zhǔn)品加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗體，這些抗體就會與HEV的多肽抗原結(jié)合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結(jié)合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結(jié)合物就會與*次孵育結(jié)合上的HEV...

2014 9-19

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